讲座回顾 

2020.01.08

  • EMASS-II型 CIEF-MS联用技术用于抗体药物电荷异质性的在线分析

    【内容简介】

     

    单克隆抗体(简称“单抗”)电荷异质性的检测是基于单抗所带电荷的差异,常用的检测方式有电聚焦凝胶电泳(IEF)、阳离子交换色谱(CEX)、阴离子交换色谱(AEX)、毛细管等电聚焦(CIEF),以及成像毛细管等电聚焦(iCIEF)等。

     

    毛细管等电聚焦(CIEF)是根据等电点(Isoelectric point,pI)差异对抗体进行分离检测,是表征抗体电荷异质性的主要手段。CIEF可以对电荷异质体高效分离,质谱(MS)检测则广泛应用于单抗的表征,二者联用可以将CIEF分离的每个电荷异质峰进行在线的鉴定。但是,将CIEF和MS联机却困难重重。

     

    永道致远科学技术有限公司发明了EMASS-II离子源,完美地解决了CIEF与MS的连接难题,第一次实现了抗体药物电荷异质性的全自动在线质谱分析,极大的提高了抗体药物电荷异质性质谱分析的效率与准确度。在此基础上永道致远结合CMP CR3520型试剂盒开发出了世界首创的“CR3520”新型毛细管等电聚焦电泳与质谱联用(CR3520 cIEF-MS)技术,已经在全世界生物制药行业取得了高度的认可。

     

    本次讲座将会对EMASS-II型CIEF-MS联用技术配合使用CMP CR3520型试剂盒,对不同场景中的生物药电荷异质性分析进行具体案例讲解。

     

    【主讲人】

     

    沈旦枫博士

     

    沈旦枫博士目前在永道致远担任应用科学家,博士毕业于复旦大学上海医学院。沈博士从事多年蛋白质糖基化研究,首次建立了完整的蛋白质甘露糖糖苷酶(gpM)系统,在聚糖相关抗原表位鉴定和聚糖相关过敏消除方向有深入研究。

  • EMASS-II型 毛细管电泳与质谱联用技术

    【内容简介】

     

    本次讲座将以毛细管电泳-质谱联用技术与传统色谱-质谱联用技术在分析目标、分离机制、结果体现等角度的差异性为切入点,通过对CE-MS方法原理,分析特点进行讲解,并辅以实际应用实例,从而说明该方法在蛋白质等大分子药物分析以及多组学分析中所体现出的特有优势。

     

     

    【主讲人】

     

    中国矿业大学(北京)副教授  铁偲

     

    北京大学分析化学博士,一直从事毛细管电泳-质谱联用技术及应用研究,主持/参与国家自然科学基金,863计划,国家科技重大专项等多项课题。发表SCI论文30余篇。研究领域涵盖CE-MS联用技术的研究,基于CE-MS技术的代谢组学研技术研究,基于CE-MS的蛋白质等大分子翻译后修饰表征技术研究等多个领域。

  • EMASS-Ⅱ型CE-MS联用平台在蛋白组学和糖组学中的应用

    【内容简介】

     

    蛋白组学和糖组学研究需要质谱技术作为必备的分析工具,而质谱技术对样品分析的准确性依赖于前端的分离效果。目前常用的蛋白质和聚糖分离方法包括液相色谱技术(Liquid chromatograph, LC)和毛细管电泳技术(Capillary electrophoresis,CE)。区别于LC利用样品极性差异作为分离手段,CE分离化合物是基于它们的分子量和电荷。

     

    毛细管电泳质谱联用技术(CE-MS)是一种有效的分离分析技术,包括以毛细管电泳作为蛋白质样品分离手段和以质谱作为检测手段,能够鉴定蛋白质多肽的分子量和氨基酸序列,还能发现蛋白质的结合位点以及翻译后修饰情况,另外对于多种聚糖结构也有优越的分离检测性能。CE-MS联用技术能挖掘出LC-MS检测范围以外的更深度的蛋白质信息,并在糖蛋白组学研究中有着极高检测灵敏度。

     

    在本讲座中,我们主要对EMASS-Ⅱ型CE-MS联用平台在蛋白组学和糖组学研究中的应用实例进行具体讲解,包括整体蛋白组学、非变性蛋白组学、糖蛋白组学和多种形式聚糖结构分析等。

     

     

     

    【主讲人】

     

    沈旦枫博士目前在永道致远担任应用科学家,博士毕业于复旦大学上海医学院。沈博士从事多年蛋白质糖基化研究,首次建立了完整的蛋白质甘露糖糖苷酶(gpM)系统,在聚糖相关抗原表位鉴定和聚糖相关过敏消除方向有深入研究。

     

     

     

  • EMASS-II型CE-MS联用技术在蛋白质组学中的前沿应用

    【内容简介】

     

    研究蛋白质组在不同生物状态下的动态变化对于阐明蛋白质在疾病发生与发展过程中的作用极其的重要。基于质谱的蛋白质组学方法已经被广泛的应用于各种生物问题的研究。在线反相色谱质谱(RPLC-MS)一般是蛋白质组学研究的首选技术。

     

    目前,基于RPLC-MS的蛋白质组学方法并不完美, 还有一些技术挑战亟待解决。首先,来源于同一个基因的不同的蛋白质形式 (proteoforms)具有不同的生物功能,所以大规模的准确分析蛋白质形式极其重要。但是对于RPLC-MS来说,这是一个艰难的任务,因为它对蛋白质形式分离有限的峰容量和灵敏度。其次,准确直接的分析完整的内源性的蛋白质复合物对于理解细胞内的生物过程至关重要,但是RPLC-MS可以发挥很有限的作用,因为在RPLC分离的过程中蛋白质复合物已经不能保持完整的形式。因此,发展新型的,高峰容量与高灵敏度的,可以用于大规模直接表征蛋白质形式与蛋白质复合物的蛋白质组学方法势在必行。毛细管区带电泳质谱技术(CZE-MS) 被认为是一个重要的极具潜力的选择。

     

    在此次演讲中,将介绍应用新型超低流速鞘流液接口和离子源(永道致远科学技术有限公司CMP Scientific品牌EMASS-II ion source)的CZE-MS技术而开发的蛋白质组学新方法,并对CZE-MS用于蛋白质组学的历史及其主要挑战和机遇,对如何改善CZE-MS对大规模的分析蛋白质形式和蛋白质复合物的方法进行讨论,和对基于CZE-MS的蛋白质组学的未来发展方向进行一些思考。

     

     

    【主讲人】

     

    孙良亮博士是密歇根州立大学化学系的助理教授,他于2016年8月加入密歇根州立大学。在此之前,他曾作为圣母大学的Norman Dovichi教授课题组的博士后(2011-2012年)以及圣母大学研究助理教授(2013-2016年)。2011年获中国科学院大连化学物理研究所分析化学博士学位,师从张玉奎和张丽华教授。2005年在大连理工大学获得生物工程学士学位。

     

    孙良亮教授课题组致力于开发基于毛细管电泳质谱的自下而上蛋白质组学(bottom-up proteomics), 自上而下蛋白质组学(top-down proteomics)以及非变性蛋白质组学(native proteomics)的新型分析工具。应用这一新工具,以高分辨率和单细胞分辨率的技术揭示脊椎动物胚胎早期胚胎发生过程中的蛋白质组学及其动力学研究。

     

    孙良亮教授发表了95篇同行评议论文,其中两篇发表在Angewandte Chemie International Edition,一篇发表在Current Opinion in Chemical Biology,25篇发表在ACS杂志Analytical Chemistry。这些论文已累计被引用超过2000次(Web of Science)。孙教授有三项美国专利,他于2019年被Journal of the American Society for Mass Spectrometry and Analytical Methods 评为新兴研究员,同年获得国家科学基金会职业奖(National Science Foundation CAREER AWARD)。此外,孙教授还是Scientific Reports杂志编委会的一员。

  • 【内容简介】

     

    随着生物药物的在临床的使用量越来越多,生物制药行业也更加重视将生物药在体内的生物途径与适当的治疗干预相结合。由于生物疗药物的复杂性,它在体内吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 研究也变得越来越复杂。ADME在体内特性表征对调整下一代生物制剂 (NGBs) 的药代动力学特征至关重要。

     

    了解药物在体内的生物途径有助于增强生物药的设计,有助于延长生物疗药物在体内预期作用点的暴露时间和达到最小毒性并保持药物的有效性。

     

    生物治疗药物在体内蛋白水解裂解可能会导致其在体内快速清除、低生物利用度和药效损失等不良效果。这些问题都通过增加生药物的免疫原性或非靶毒性来影响药物疗效以及可能产生的安全问题。全自动的免疫亲和纯化(IA)−毛细管电泳−质谱法(CE−MS)工作平台在早期的药物发现阶段中可表征生物治疗药物在体内的生物转化,可以加速药物的开发过程。免疫亲和纯化分析法因其敏感性和通量而被广泛应用于研究体内生物药的生物途径,然而,这些方法缺乏精确鉴定蛋白质一级序列变化的分析能力。

     

    相比之下,质谱(MS)的使用已经成为生物药物分解代谢谱分析的重要技术,其提供准确的定性和定量分析结果。毛细管电泳(CE)已被广泛应用于纯化生物治疗药物的表征,用于测量如纯度、电荷异质性和糖基化等关键质量属性。CE-MS也在蛋白质组学、治疗性蛋白药物完整质量分析、电荷变异分析以及生物转化研究等方面大放异彩。IA-CE-MS平台的试剂经过精心优化,以最大限度地提高分离产量,同时最小化实验步骤的数量达到分析结果。IA-CE-MS是一个综合性表征生物疗药物的方法集成平台,其能表征的生物疗药物包括肽体、单克隆抗体和双特异性抗体等。

     

    永道致远拥有全世界性能最优良的电渗流驱动的同轴鞘流液的EMASS-II型CE-MS联用技术,第一次实现了蛋白药物全自动在线质谱分析,并且结合永道致远的CR3520型全自动cIEF-MS电荷异质性质谱分析试剂盒,全球第一次实现了蛋白药物电荷异质性cIEF-MS在线分析,极大的提高了蛋白药物质谱分析的效率与准确度、在全世界生物制药行业取得了高度的认可。

     

     

    【主讲人】

     

    夏强为博士是永道致远科学技术有限公司创始人。其创办的美国CMP质谱科技公司在CE-MS联用领域取得重大突破,用于CE-MS联用的EMASS-II型离子源产品在世界顶尖生物制药公司的生物药质量分析表征和临床前药物代谢分析中起到重要作用。夏博士领导CMP质谱科技公司与全球诸多分析仪器公司进行了多方面的合作。2018年初CMP质谱科技公司与安捷伦科技公司正式签订全球共同市场营销协议,为全世界的生物制药与生命科学用户提供最先进的CE-MS技术平台。

    EMASS-II型CE-MS平台加速下一代生物药设计

  • 【内容简介】

     

    随着生物药物的在临床的使用量越来越多,生物制药行业也更加重视将生物药在体内的生物途径与适当的治疗干预相结合。由于生物疗药物的复杂性,它在体内吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 研究也变得越来越复杂。ADME在体内特性表征对调整下一代生物制剂 (NGBs) 的药代动力学特征至关重要。了解药物在体内的生物途径有助于增强生物药的设计,有助于延长生物疗药物在体内预期作用点的暴露时间和达到最小毒性并保持药物的有效性。生物治疗药物在体内蛋白水解裂解可能会导致其在体内快速清除、低生物利用度和药效损失等不良效果。这些问题都通过增加生药物的免疫原性或非靶毒性来影响药物疗效以及可能产生的安全问题。全自动的免疫亲和纯化(IA)−毛细管电泳−质谱法(CE−MS)工作平台在早期的药物发现阶段中可表征生物治疗药物在体内的生物转化,可以加速药物的开发过程。免疫亲和纯化分析法因其敏感性和通量而被广泛应用于研究体内生物药的生物途径,然而,这些方法缺乏精确鉴定蛋白质一级序列变化的分析能力。

     

    相比之下,质谱(MS)的使用已经成为生物药物分解代谢谱分析的重要技术,其提供准确的定性和定量分析结果。毛细管电泳(CE)已被广泛应用于纯化生物治疗药物的表征,用于测量如纯度、电荷异质性和糖基化等关键质量属性。CE-MS也在蛋白质组学、治疗性蛋白药物完整质量分析、电荷变异分析以及生物转化研究等方面大放异彩。IA-CE-MS平台的试剂经过精心优化,以最大限度地提高分离产量,同时最小化实验步骤的数量达到分析结果。IA-CE-MS是一个综合性表征生物疗药物的方法集成平台,其能表征的生物疗药物包括肽体、单克隆抗体和双特异性抗体等。

     

    永道致远有用全世界性能最优良的电渗流驱动的同轴鞘流液的EMASS-II型CE-MS联用技术,第一次实现了蛋白药物全自动在线质谱分析,并且结合永道致远的CR3520型全自动cIEF-MS电荷异质性质谱分析试剂盒,全球第一次实现了蛋白药物电荷异质性cIEF-MS在线分析,极大的提高了蛋白药物质谱分析的效率与准确度、在全世界生物制药行业取得了高度的认可。

     

    本次讲座在公司讲解EMASS-II型CE-MS联用技术的技术细节、并以合作方Amgen提供蛋白药物在体内代谢为例,介绍永道致远EMASS-II型CE-MS与IA联合平台如何用对生物疗药物在体内代谢的表征分析,并介绍如何IA-CE-MS平台助力下一代生物治疗药物的设计。

     

     

    【主讲人】

     

    夏强为博士是永道致远科学技术有限公司创始人。其创办的美国CMP质谱科技公司在CE-MS联用领域取得重大突破,用于CE-MS联用的EMASS-II型离子源产品在世界顶尖生物制药公司的生物药质量分析表征和临床前药物代谢分析中起到重要作用。夏博士领导CMP质谱科技公司与全球诸多分析仪器公司进行了多方面的合作。2018年初CMP质谱科技公司与安捷伦科技公司正式签订全球共同市场营销协议,为全世界的生物制药与生命科学用户提供最先进的CE-MS技术平台。

     

    全自动化免疫亲和纯化联合EMASS-II型CE−MS平台加速下一代生物治疗药物的设计

  • 【内容简介】

     

    基因组水平和转录组水平的信息不能准确反映蛋白质组水平的信息,原因在于转录后的调控也会调节基因的表达。蛋白质翻译后修饰(PTMs)也会影响蛋白质的功能,并且细胞中的大多数蛋白质会与蛋白质、RNAs、金属离子或其他小分子等形成复合物而起作用,故研究蛋白质组的特征将有利于揭示蛋白质、蛋白质PTMs和蛋白质复合物在生物体发育和疾病过程中的作用机制。

     

    自上而下的蛋白质组学(Top-down proteomics)是在完整蛋白质水平上对蛋白质组进行大规模表征的常用方法。此方法对于从同一基因衍生的各种蛋白质分子和蛋白质形式因基因水平发生变化、RNA水平的选择性剪接、以及蛋白质水平的PTMs进行高分辨率表征是非常有用的。人类蛋白质组中的蛋白质体(proteoform)数目估计超过100万个。在质谱分析(MS)之前对蛋白质进行高效分离对于深入的、高分辨率分析自上而下的蛋白质组学是必不可少的。毛细管区带电泳(CZE)被认为是自上而下蛋白质中对蛋白质进行高效分离的有力工具。

     

     

    【主讲人】

     

    孙良亮博士是密歇根州立大学化学系的助理教授,他于2016年8月加入密歇根州立大学。在此之前,他曾作为圣母大学的Norman Dovichi教授课题组的博士后(2011-2012年)以及圣母大学研究助理教授(2013-2016年)。2011年获中国科学院大连化学物理研究所分析化学博士学位,师从张玉奎和张丽华教授。2005年在大连理工大学获得生物工程学士学位。

     

    孙良亮教授课题组致力于开发基于毛细管电泳质谱的自下而上蛋白质组学(bottom-up proteomics), 自上而下蛋白质组学(top-down proteomics)以及非变性蛋白质组学(native proteomics)的新型分析工具。应用这一新工具,以高分辨率和单细胞分辨率的技术揭示脊椎动物胚胎早期胚胎发生过程中的蛋白质组学及其动力学研究。

     

    孙良亮教授发表了95篇同行评议论文,其中两篇发表在Angewandte Chemie International Edition,一篇发表在Current Opinion in Chemical Biology,25篇发表在ACS杂志Analytical Chemistry。这些论文已累计被引用超过2000次(Web of Science)。孙教授有三项美国专利,他于2019年被Journal of the American Society for Mass Spectrometry and Analytical Methods 评为新兴研究员,同年获得国家科学基金会职业奖(National Science Foundation CAREER AWARD)。此外,孙教授还是Scientific Reports杂志编委会的一员。

    毛细管区带电泳质谱联用技术(CZE-MS)在自上而下蛋白质组学中的应用

  • 【内容简介】

     

    基于毛细管电泳技术的蛋白质分子的分离具有峰形尖锐、样品残留少、无峰拖尾、分离效率高等诸多优点。深圳市永道致远科学技术有限公司的EMASS-II型新型毛细管电泳和质谱联用技术(CE-MS)采用一种基于电渗流泵的超低流速同轴鞘流液纳流电喷雾接口,以其美国子公司CMP质谱科技公司的EMASS-II型毛细管电泳与质谱联用离子源产品形式在市场销售。与同类产品相比,EMASS-II型CE-MS技术能提供更高的检测灵敏度和分离效率,实现各种主流毛细管电泳和电喷雾质谱的有效、方便、稳定联用。

     

    本次会议主要与大家分享永道致远的新型毛细管电泳和质谱联用技术在抗体药物电荷异质性方面的应用。在结合CE-MS技术背景以及方法原理的基础上,为用户展示使用全自动毛细管等电聚焦电泳与质谱联用(CIEF-MS)方法进行抗体药物电荷异质性在线分析的实例,使大家充分了解CE-MS的技术优势和应用范围,以便更好服务于研发及生产工作。

     

     

    【主讲人】

     

    冯腾 深圳市永道致远科学技术有限公司(应用科学家)

    冯腾博士毕业于香港科技大学化学工程及生物工程系,目前在深圳市永道致远科学技术有限公司担任应用科学家,拥有多年的跨学科研究经历,在生物技术、生命科学研究、生物大分子材料、药物递送等领域积累了丰富的经验。冯腾博士自加入永道致远以来,已经参与了数十个抗体药物电荷异质性的CIEF-MS在线分析,积累了丰富的经验。

     

    抗体药物电荷异质性的CIEF-MS质谱在线分析

  • CR3520型cIEF-MS检测用于抗体鸡尾酒疗法电荷异质性研究

    【内容简介】

     

    新型冠状病毒疫情下,临床药物和疫苗的研发刻不容缓。在单克隆抗体药物“鸡尾酒”疗法近年来用于埃博拉病毒临床实验的基础上,新冠病毒疾病抗体鸡尾酒的大规模生产已有报道。

     

    在抗体药物开发过程中,翻译后修饰引起的电荷异质性是影响药物活性和安全性的重要质量指标。电荷异质性的分析对于原研药研发和生物类似药都非常重要。目前常用的离子交换色谱用于电荷异质性分析的方法,需要为每个单独的目标蛋白质分子开发独特的梯度,存在方法开发耗时、不能得到和毛细管等电聚焦一致的分离、收集组分和样品富集劳动强度大、低丰度杂质峰有丢失的风险、过长的样品处理过程容易导致蛋白质变性或引起额外的修饰、复杂样品的酸碱峰分离和鉴定难度大等挑战。 

     

    基于毛细管电泳技术的蛋白质分子的分离具有峰形尖锐、样品残留少、无峰拖尾、分离效率高、分辨率高、可与质谱在线联用、样品保真度高、检测灵敏度高等诸多优点。永道致远以世界领先的EMASS-II型毛细管电泳与质谱联用技术(CE-MS),开发出全球首创的CR3520型全自动cIEF-MS检测试剂盒

     

    本讲座着重介绍永道致远针对抗体鸡尾酒疗法开发出的,在三个抗体联合用药时的电荷异质性在线质谱分析方法。另外,在讲座中我们还会以美国国家标准与技术研究院的标准单抗、ADC药物、贝伐单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、达雷木单抗、德瓦鲁单抗、托珠单抗、EPO、以及派姆单抗作为例子,展示对于重组蛋白质生物药的一系列重点应用。其中包含整体分子量、还原单抗、IdeS酶解亚基等的CE-MS分析。

     

    永道致远提供的新型CE-MS联用技术和CR3520型全自动毛细管等电聚焦电泳与质谱联用(cIEF-MS)方法,在单抗药物电荷异质性的在线分析、EPO生物类似药,以及抗体鸡尾酒联合用药的质谱在线分析中得到充分显示。讲座中还会结合实例,详细讲解永道致远CR3520型cIEF-MS样品检测用于生物药电荷异质性研究的样品分析服务流程。

  • 【内容简介】

     

    由于蛋白翻译后修饰和降解而产生的电荷异质性属于治疗性抗体的关键质量属性(critical quality attributes, CQA),因此对于抗体药物电荷异质性的分析贯穿于抗体药物的全生命周期,其中包含细胞株筛选、制剂配方开发、上游工艺优化、下游纯化工艺开发、工艺放大、稳定性研究、批间次比对、分析方法开发验证、产品质量标准建立以及质量鉴定和放行等。由于造成抗体药物电荷异质性的原因错综复杂,现有的技术手段不足以高效准确的提供电荷异质性的分析表征。

     

    永道致远在其性能优良的EMASS-II型CE-MS联用技术基础上,开发出了世界首创的“CR3520”新型毛细管等电聚焦电泳与质谱联用(CR3520 cIEF-MS)技术,第一次实现了抗体药物电荷异质性的全自动在线质谱分析,极大提高了抗体药物电荷异质性质谱分析的效率与准确度,在全世界生物制药行业取得了高度的认可。本次讲座在公司前几次讲座的基础上,进一步深入讲解EMASS-II型CE-MS联用技术的技术细节,并以常见的几种单克隆抗体药物为例,介绍CR3520型cIEF-MS技术如何用于抗体药物强制降解(forced degradation)研究中电荷异质性的高效在线分析。

     

     

     

    CR3520型全自动cIEF-MS技术用于抗体药物稳定性研究中电荷异质性的高效分析

  • 【内容简介】

     

    基于毛细管电泳技术的蛋白质分子的分离具有峰形尖锐、样品残留少、无峰拖尾、分离效率高等诸多优点。 永道致远的EMASS-II型新型毛细管电泳和质谱联用技术(CE-MS)采用了一种基于电渗流泵的超低流速同轴鞘流液纳流电喷雾接口。 其美国子公司CMP质谱科技公司的EMASS-II型毛细管电泳与质谱联用离子源产品形式在市场销售。与同类产品相比,EMASS-II型CE-MS技术能提供更高的检测灵敏度和分离效率。 这种新型CE-MS联用离子源能实现各种主流毛细管电泳和电喷雾质谱的有效、方便、并且稳定的联用。本次会议主要与大家分享永道致远的新型毛细管电泳和质谱联用技术 和公司产品在生物制药、蛋白质组学、代谢组学领域的众多应用。在结合CE-MS技术背景以及方法原理的基础上,为用户分别展示全自动毛细管等电聚焦电泳与质谱联用(CIEF-MS)方法进行多种单抗药物电荷异质性在线分析的实例、多种类型蛋白质组学以及代谢组学的应用实例,使大家充分了解到CE-MS的技术优势及应用范围,更好的服务于研发及生产工作。

    新型毛细管电泳质谱联用技术在生物药电荷异质性分析、蛋白质组学及代谢组学中的应用

填写表单即可观看该视频

姓名 *

公司 *

职位 *
电话 *

邮箱 *

公司是否有质谱设备 *
目前的主要研究方向?
您所在单位/实验室未来是否有毛细管电泳仪的采购计划? *